今天pink来给大家分享一些关于革兰氏染色法革兰氏染色步骤是什么 方面的知识吧，希望大家会喜欢哦
1、革袭瞎兰氏染色一般包括初染、媒染、脱色、复染等方法是：
2、涂片固定。
3、2）草酸铵1分拍纤空钟。
4、3）蒸馏水冲洗。
5、4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。
6、5）水洗，用吸水纸吸去水分。
7、6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
8、7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸竖竖馏水冲洗。干燥，镜检。
9、扩展资料
10、革兰氏染色原理是通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
革兰氏阳性菌遇乙醇或丙酮脱色处理时，不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌在遇脱色剂后，呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
其中，染色的差异主要是阴性与阳性细菌细胞壁的差异所引起的。
大肠杆菌的形态是杆状的，经革兰氏染色菌体颜色变成红色，说明大肠杆菌是革兰氏阴性（咐笑败G-）细菌升判。
金黄色葡萄球菌的形态是球状的，经革兰氏染色菌体颜色变成蓝紫色，说明金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性（G+）细菌。
革兰氏染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。
扩展资料
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
（1）涂片固定。
（2）草酸铵结晶紫染1分钟。
（3）蒸馏水衡颤冲洗。
（4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。
（5）水洗，用吸水纸吸去水分。
（6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
（7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗，干燥，镜检。
参考资料来源：百度百科--革兰氏染色
参考资料来源：百度百科--革兰氏染色法
一、革兰氏染色法
不少于两种染料参与的染色方法称之为复染法，革兰氏染色法属于复染法类的一种染色方法。由结晶紫、碘液、番红参与，通过染料对细菌的细胞壁的着色，来区分革兰氏阴性菌与阳性菌的一种方法。
二、主要步骤及关键步骤
（1）制片。
取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。
要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色；涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性；火焰固定不宜过热（以玻片不烫手为宜）。
（2）初染。
滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）染色1-2min，水洗。
（3）媒染。
用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1min，水洗。
（4）脱色。
用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。
乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节：脱色不足，阴性菌被误染成阳性菌；脱色过度，阳性菌被误染成阴性菌。因而脱色时间一般为20-30s。
（5）复染。
用番红液复染约2min，水洗。
（6）镜检。
干燥后，用油镜观察。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌，被染成红色的为革兰氏阴性菌。
扩展资料：
革兰氏染色的原理
结晶紫（C25H30ClN3）当中的CL-与I-发生氧化还原反应生成不溶于水的蓝紫色复合物（C25H30lN3）。
革兰氏阳性菌细胞壁较厚且肽聚糖网层次多而交联致密，进行脱色时，因失水反而使网孔卖宏或缩小，再加上结构中不含类脂，所以脱色处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内。
而革兰氏阴性菌因中伍其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网绝滑不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过脱色处理后后仍呈无色状态，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。
参考资料来源：百度百科——革兰氏染色法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
1）涂片固定。
2）草酸铵结晶紫染1分茄凳钟。
3）蒸馏水冲洗。
4）加碘液覆盖涂面染约1分祥纳拍钟。谨羡
5）水洗，用吸水纸吸去水分。
6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。
7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，镜检。
扩展资料
革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感）：大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，可以选择青霉素族，头孢曲松钠等。
革兰氏阴性菌，大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙星，左氧氟沙星等，也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。
参考资料来源：百度百科-革兰氏染色
参考资料来源：百度百科-革兰氏染色法
一、定义
革兰氏染色法是由1884年由丹麦医师gram创立的一种复染色法，用以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，对其进行分类鉴定。
二、染色原理
1、g﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留雀旁结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。
2、gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。
三、染色目的
在细胞发放之前，利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测，判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
四、染色方法步骤
1
、涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2、
干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。
3、固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过
60℃），放置待冷后，进行染色。
4、
初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
5
、水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
6
、媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
7
、水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈余敏无色为止。
8
、脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30s，随即水洗。
9
、复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
10
、水洗：斜置载玻片竖岁枝，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
11
、干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后滴一滴浸油在玻片上，用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌。
五、注意事项
1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。
2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。
3、选用幼龄的细菌。g+菌培养12h-16h，e.coli培养24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
原理：革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。
步骤：
(一)涂片固定
在干净的载玻片中央滴加一滴蒸馏水，掘团用接种环进行无菌操作，挑取培养物少许，置载玻片的水滴中，与水混合做成菌悬液并涂布成直径约1cm的薄层。
(二)染色
在固定过的涂片菌膜上滴加草酸铵结晶紫染液，染色液应完全覆盖整个菌膜，染色1min。
(三)水洗
染色到一定的时间，拿住玻片使之成450角，用细小的水流把多余的染料冲洗掉，被菌体吸附的染料则保留。
(四)媒染
加碘液覆盖涂面染1min。在媒染处理时，媒染剂与染料形成不溶性的化合物，可增加染料和细菌的亲和力。
(五)水洗，用吸水纸吸去水分
用细小的水流缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。
(六)脱色
加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20s~30s后再进行水洗，吸去水分。
(七)复染
蕃红染色液染色10s后，自来水冲洗。
(八)干燥，镜裂散扰检
染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。
扩展资料
标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
(1)杀死微生物，固定细胞结构。
(2)保证菌体能更牢固的粘附在载玻片上，防止标本水洗时被水冲洗掉。
(3)改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
参考资料来源：百度百科-革兰氏染色法
参考资料来肆旦源：百度百科-革兰氏染色
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